Ribo-seq——檢測正在翻譯的RNA信息，連接轉錄組學與蛋白質組學的橋梁

Ribo-seq技術原理

翻譯（Translation）是基因表達的關鍵步驟，是指信使RNA（mRNA）攜帶的遺傳信息被核糖體解碼并轉化為特定氨基酸序列的過程。蛋白質翻譯的調控是高度精準、多層次、動態化的過程。

在全基因組水平上，轉錄與翻譯經常存在顯著差異。通過轉錄組測序鑒定的上調表達基因中，只有其中20%在蛋白水平上調。

核糖體印跡測序（Ribosome profiling, Ribo-seq），能夠精細解析細胞內的翻譯過程。Ribo-seq的技術核心是識別與核糖體結合的RNA，以及正在被翻譯的約30個核苷酸。對核糖體結合的RNA片段進行測序，能夠精確記錄核糖體在翻譯過程中的位置。將轉錄組與Ribo-seq數據聯合分析，可以計算量化蛋白質的合成速率。通過Ribo-seq分析，能夠鑒定新型的uORF、microPeptide、發現新穎的翻譯調控機制以及能夠被翻譯的lncRNA。

Ribo-seq已經應用于解析生長發育與分化、疾病發生機制和抗逆分子機制的研究。

應用方向

Ribo-seq應用于研究轉錄本的翻譯活性、鑒定翻譯起始位點、密碼子使用、ORF位置和mRNA的翻譯調控機制。

Ribo-seq技術已經廣泛應用在動物、植物和微生物的研究中，用于揭示生長發育、形態建成、疾病發生、逆境脅迫響應的調控機制。總之，Ribo-seq能從基因組水平檢測正在翻譯的mRNA序列信息，揭示核糖體在mRNA上的位置和翻譯活性，并幫助解析翻譯調控機制。

分析內容

● 比對去除rRNA、tRNA、sRNA等

● Reads長度分布統計與長度過濾

● 比對參考基因組

● 測序飽和度分析

● ORF在基因組上的分布統計與分類

● 三堿基節律分析

● 翻譯基因統計與表達量分析

● 樣本關系分析

● 組間差異翻譯基因分析

● 差異翻譯基因的GO和KEGG功能富集分析

● ORF的翻譯潛力分析

● ORF的特征分析

結果展示

Clean reads長度統計

Reads在參考基因組不同區域的分布

P-Site分析

ORF分析

ORF翻譯潛力分析

ORF特征鑒定

uORF對annotated ORF的影響

Ribo-seq與轉錄組數據聯合分析

我們的優勢

● 實驗周期快、質量高、結果穩定可靠。

● 豐富的物種經驗。

已做物種

人　小鼠　大鼠　豬　家蠶　果蠅　擬南芥　小麥　水稻 玉米　煙草　毛白楊　胡楊　甘薯　甲藻等